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LAMP Green™ *50X DMSO 溶液*
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货号 | 17555 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 100 ul | 价格 | 3540 | |
| Ex (nm) | Em (nm) | |||
| 分子量 | 578.73 | 溶剂 | DMSO | |
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
等温扩增方法以流线型、指数方式提供核酸靶序列的检测。现有成功检测 LAMP 反应的染料大多基于使用比色分析的终点法。 LAMP Green 可以对 LAMP 反应进行实时荧光测量。可以使用普通实时 PCR 仪器上的 SYBR 或 FAM 通道检测染料。 LAMP Green 与琼脂糖凝胶电泳兼容，可以在凝胶上运行并通过凝胶成像仪进行分析。
适用仪器
| qPCR | |
| 仪器规格： | SYBR 或 FAM 滤波片 |
| 荧光酶标仪 | |
| Ex(nm): | 490 |
| Em(nm): | 525 |
| cutoff: | 515 |
| 推荐孔板： | 纯黑色孔板 |
产品说明书
样品实验方案
表 1. 25 μL LAMP 反应混合物
| 成分 | DNA/RNA 目标检测 | 无模板对照（NTC） |
| LAMP master mix (2X） | 12.5ul | 12.5ul |
| LAMP primer mix (10X) | 2.5ul | 2.5ul |
| LAMP Green (50X) | 0.5ul | 0.5ul |
| Target DNA/RNA | Varies | 0ul |
| ddH2O | Varies | 9.5ul |
| 总容积 | 25ul | 25ul |
以下方案可用作指导，应根据您的实验需要进行优化
1.在室温下解冻所有要使用的组件并放在冰上。 短暂涡旋混合并离心以收集材料。
2.如表 1 所述制备反应混合物。列出了 25 μL/LAMP 反应的体积。 根据使用情况相应调整体积。 如有必要，可以优化 LAMP Green 浓度。
3.涡旋反应混合物和离心机收集材料。
4.密封反应容器。
5.在 65°C 下孵育 30 分钟。 如有必要，可以延长时间（即，对于低拷贝目标、具有挑战性的样品类型或已知会产生较慢扩增时间的反应）
6.如果使用 qPCR仪，可以使用 SYBR 或 FAM 滤波片实时读取信号。 对于基于酶标仪的检测，在 Ex/Em = 490/525 nm（Cutoff = 515 nm）处测量信号
7.如果在 LAMP 反应完成后分析反应产物，则通过在 >80°C 下加热 5 分钟使酶失活。
注意：LAMP Green 与琼脂糖凝胶电泳兼容，因此可以在琼脂糖凝胶上分析样品。
图示
图1. HeLa 细胞中 BRCA1 的 LAMP 检测。 使用 ABI 7500 qPCR 仪将 HeLa 细胞中的 500 ng（绿色）、50 ng（蓝色）、5 ng（橙色）和 NTC（黑色）的 gDNA 用于与 LAMP Green 荧光染料的 LAMP 反应