TSK-GEL 离子交换色谱柱

发表于由

TSK-GEL 离子交换色谱柱

TOSOH 提供了一系列用阴阳离子交换方式进行分析和分离生物分子的高效液相色谱柱.在任何一种离子交换模式既有甲基丙烯酸酯也有硅胶基的色谱柱。蛋白质、多肽、DNA 和、核苷酸衍生出来的RNA以及其他核酸片断都是TSK-GEL 阴离子交换色谱柱分析分离的典型样品。基于聚苯乙烯基体材料的阴离子交换柱适合用于小分子量的糖类氨基酸、核酸碱基及小分子的备选药物。

新型BioAssit色谱柱特性及优点

➣ 即使对较大的蛋白质也具有高容量>100KD,

➣ 取得相同样品量的流动相耗量小

➣ 具有能提供快速传输的独特孔结构,更加尖锐的峰形改善了分析和分离

➣ 硬件为具有生物相容性的PEEK柱,由于吸附产生的样品损失较小

聚合物基的离子交换色谱柱特性及优点

➣ 甲基丙烯酸酯骨架化学稳定性（pH2-12）

➣ 较大的孔尺寸（1000A）排出的蛋白质极限为5000，000Da

➣ 无孔树脂基体柱(NPR)

➣ 机械性能稳定

➣ 耐碱、有机溶剂、改性剂表面剂重复清洗

➣ 对大多数生物聚合物使用相同住

➣ 快速QC分析和工艺监测

➣ 降低溶剂消耗和分析时间

硅胶基体的离子交换色谱柱特性及优点

较小的孔尺寸2SW=125Å、3SW=250Å，适合分析较小的分子量的样品，如核苷、备选药物、儿茶酚、小肽。

TSK–GEL 阴离子交换色谱柱特性及优点

➣ 填充了多孔结构和化学键合的树脂TSK gel BIoAssist Q 柱对分子量大小不同的蛋白质和核酸具有高交换容量。

➣ TSK-GEL DNA–NPR 柱可用于PCR片段的分析

➣ TSK-gel SuperQ－5pw 柱由于采用了新的键合化学技术，所以比TSK-gel DEAE -5pw柱有更高的交换容量。

TSK-GEL 阳离子交换色谱柱特性及优点

➣ TSK gel BIoAssist S对中等和大分子量的蛋白质具有高度交换容量

➣ 因小孔径和大比表面积 TSK gelDEAE-2SW与小分子和中等分子的蛋白质结合能力高于5pw两倍。

TSK离子交换柱选择

样品类型

分子量范围（Da）

Tsk-gel 柱

pH 范围

氨基酸 多肽和蛋白

氨基酸

< 2000

SAX
SCX

1-14
1-14

肽和小蛋白

<10000

SCX
SP-2SW
CM-2SW
DEAE-2SW
QAE-2SW

1-14
2-7.5
2-7.5
2-7.5
2-7.5

多肽和小蛋白

30000

CM-3SW
DEAE-3SW

2-7.5
2-7.5

蛋白

> 10000-5000000

BioAssist S
BioAssist Q
SP-5PW
DEAE-5pw
CM-5PW

2-12

核酸

嘌呤和嘧啶

DEAE-2SW
SP-2SW

2-7.5
2-7.5

核苷

SP-2SW
DEAE-2SW

2-7.5
2-7.5

核苷酸

DEAE-2SW

2-7.5

寡聚核苷酸

DEAE-5PW
DEAE-NPR
DNA-NPR
SUPERQ-5PW

2-12
2-12
2-12
2-12

DNA RNA 和 PCR 产品

DNA-NPR
DEAE-NPR
DEAE-5PW
DEAE-3SW

2-12
2-12
2-12
2-7.5

其它分子

单双糖

Sugar AX1 ,AXG
SCX
SAX

1-14
1-14
1-14

有机酸

OAPAK-A

2-12

下面是常用的离子交换色谱柱的应用实例

下图是用阴离子离子交换色谱柱TSK-GEL SUGAR AXG 预柱反应后测定各类糖类纤维二糖、麦芽糖、乳糖、鼠李糖、来苏糖、核糖、甘露糖、海藻糖、阿拉伯糖、半乳糖、木糖等。

Sample:

糖的标准品

Compound:

1) Cellobiose, 2) Maltose, 3) Lactose, 4) Rhamnose, 5) Lyxose, 6) Ribose, 7) Mannose, 8) Fucose, 9) Arabinose, 10) Galactose, 11) Xylose, 12) Glucose

Chromatographic conditions

Column(s)[Column, Cat.No., Dimension, Particle Size, Number]:

1) TSKgel Sugar AXG, 8640, 4.6*150(mmI.D.*mm), (um), 1

Mobile Phase:
A: 0.6 mol/l borate buffer (pH 7.7)
B: 0.7 mol/l borate buffer (pH 7.25)
C: 0.7 mol/l borate buffer (pH 8.7)
Stepwise gradient

Temperature: 70C

Detection: 1) FS : ex.: 331 nm em.: 383nm

Injection vol: 20ul

Sample load: Each of monosaccharide: 25 umol/lumol/l, disaccharide: 50umol/l

Note: Post column reactionReaction reagent: 2.5% 2-Cyanoacetamide solution
Reaction Temperature: 100 C

Source/reference: TOSOH Separation Report Vol.: No.: 42 p: 7 – 7(2) ( )

Title: Separation of saccharides on TSKgel Sugar AXG

TSK-GEL 离子交换色谱柱

下面的谱图是 采用 OAPAK离子排除 色谱柱，用离子排除色谱 和不同的检测器，测定各种有机酸 丙酮酸、酒石酸、柠檬酸、苹果酸、焦谷氨酸 、乳酸、醋酸、丁二酸

Sample:

有机酸标准品

Compound:

1) Pyruvic acid, 2) Tartaric acid, 3) Citric acid, 4) Malic acid, 5) Pyroglutamic acid, 6) Lactic acid, 7) Acetic acid, 8) Succinic acid

Chromatographic conditions

Column(s)[Column, Cat.No., Dimension, Particle Size, Number]:

1) TSKgel OApak-P, 16654, 6.0*40(mmI.D.*mm), (um), 1

2) TSKgel OApak-A, 16653, 7.8*300(mmI.D.*mm), (um), 2

Mobile Phase:

0.75 mM sulfuric acid

Flow rate:

0.8ml/min

Temperature:

60C

Detection:

1) CM 2) UV/VIS : 210nm 3) UV/VIS : 450nm

Injection vol:

20ul

Sample load:

1) 50ppm, 2) 500ppm, 3) 500ppm, 4) 500ppm, 5) 500ppm, 6) 1000ppm, 7) 2000ppm, 8) 1000ppm

Note:

Peak 4′: Degradation product of malic acid
VIS (450 nm) detection with post-column reaction:
Reaction solution; 0.2 mmol/l BTB in 15 mmol/l disodium hydrogenphosphate buffer (pH 8.6)
Flow rate: 0.8 ml/min

TSK-GEL 离子交换色谱柱

TSK-GEL 离子交换色谱柱