产品信息｜Certificate of Analysiss

rLys-C蛋白酶, 质谱级

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HLS LYS001C

20µg

HLS HAc001

rLys-C 蛋白酶

500µl

说明: 质谱级rLys-蛋白酶特异性水解在赖氨酸片段的C端的肽键。可用于提高对不易水解的蛋白质的消化; 推荐在6-8M尿素溶液中进行

物理形态: 质谱级rLys-C蛋白酶是冻干粉，含0.5mg海藻糖/瓶

分子量:27kDa.

溶解液（HLS HAc001C）：rLys-C蛋白酶复溶解缓冲液建议1mM盐酸或50mM醋酸

储存条件：冻干粉末存储在-20℃冰箱，再溶解的酶储存在-20℃。有效期见产品标签

保质期：12月在-20℃

pH 值范围: 在8-9 时，rLys-C 具有很好的活性

适用范围：rLys-蛋白酶特异性水解变性后比较不易酶切的蛋白质K位，推荐和Trypsin混合使用。

混合酶推荐SOP:

A. 通用溶液酶解法

100ug Trypsin/20ug rLys-C 混合酶按照 25:1 蛋白和蛋白酶的量(w/w)使用, 37°C恒温过夜13-16小时.

温馨提示：尿素的浓度最好小于1M, 50mM Tris-HCl 缓冲溶液(pH 8)

B. 1+1步溶液酶解法

1. 100ug Trypsin/20ug rLys-C 混合酶按照25:1 蛋白和蛋白酶的量(w/w)使用, 37°C.恒温酶解2-4小时.

温馨提示：尿素的浓度为6-8M, 50mM Tris-HCl 缓冲溶液(pH 8)

2. 稀释上一步的溶液6倍，37°C恒温过夜13-16小时

温馨提示：尿素的浓度最好小于1M, 50mM Tris-HCl 缓冲溶液(pH 8)

质量控制｜Quality Control

纯度： 液相色谱280nm检测杂质蛋白质峰强度，rLys-C峰强度大于99.9%

专一性：E.coli大肠杆菌样品，ESI-MS/MS质谱分析K端的专一性大于99.5%

活性:25unit/min/mg; 单位定义：rLys-c白蛋酶每分钟酶切1.0 umole T-G-P Lys Nitroanilide的量，反应条件：25℃，波长405nm

Maldi TOF质谱检测: 纯化后的蛋白酶使用HCCA基质激光解析质谱分析未见杂质蛋白质峰

LC-MS/MS 质谱分析: 使用rLys-c酶解HSA(人血清白蛋白，纯度99.9%)实验，DTT还原，IAA保护,PH8.0, 37°C恒温过夜16小时,液质Q-E联

用仪 分析，覆盖率87%