产品信息｜Certificate of Analysiss

rTrypsin-N蛋白酶, 质谱级

订货号

产品名称

HLS TRY001N

rTrypsin-N 蛋白酶

包装

20µg

说明: 质谱级rTrypsin-N蛋白酶特异性水解在赖氨酸K和精氨酸R片段的N端的肽键。新的酶切N端的系列蛋白酶

物理形态: 质谱级rTrypsin-N蛋白酶是冻干粉，每瓶含有 0.47 mg HEPES; 0.05mg CaCL2

分子量: 29kDa.

溶解液: 建议使用超纯水40ul溶解后使用， PH=7.5

储存条件：冻干粉末存储在-20℃冰箱，再溶解的酶储存在-20℃或-80℃。有效期见产品标签

保质期：24月在-80℃

pH 值范围: 在PH7.5 时，rTrypsin-N 具有很好活性

适用范围：rTrypsin-N蛋白酶特异性水解变性后蛋白质K位和R位肽键。

通用溶液酶解法：

1. 蛋白酶推荐酶切体系：20-50mM HEPES或Tris 缓冲液

2.

使用条件：按照 20:1 蛋白和蛋白酶的量(w/w)使用, 37°C恒温反应4小时以上.

温馨提示：

1.活性：建议蛋白样本经过变性和烷基化处理后，同时严格执行酶切反应体系和SOP

2. 敏感性： 对1mM DTT, 0.1mM盐酸胍, 0.8M尿素，5%乙腈 敏感，会降低酶切效率

质量控制｜Quality Control

纯度：液相色谱280nm检测杂质蛋白质峰强度，rTrypsin-N峰强度大于99.0%

专一性: 人血清白蛋白HSA样品，ESI-MS/MS质谱分析R/K端的专一性大于95.0%

活性: 140unit/mg; 单位定义：r Trypsin N白蛋酶在366nm光密度值半数时，酶切叠氮酪蛋白的单位量，反应条件：37℃保温30min，PH=10

Maldi TOF质谱检测: 纯化后的蛋白酶使用FA基质激光解析质谱分析未见杂质蛋白质峰

LC-MS/MS 质谱分析: 使用rTrypsin N酶解HSA(人血清白蛋白，纯度99.9%)实验，DTT还原，IAA保护, PH7.5, 37°C恒温酶切4小时,液质Q-E

联用仪 分析，覆盖率83%