ProtoScript cDNA 第一链合成试剂盒–NEB

产品资料 – RNA 试剂 – cDNA 合成

ProtoScript cDNA 第一链合成试剂盒                              收藏

ProtoScript cDNA 第一链合成试剂盒--NEB

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#E6300L
150 次反应
5,929.00元

#E6300S
30 次反应
1,489.00元

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特性

 提供酶混合液与反应混合液,建立反应更加便捷
 适合各种需求的 PCR
 不同起始量的 RNA 都能高效反转录
 合成至少 5 kb 长度的 cDNA 

概述

 ProtoScript cDNA 第一链合成试剂盒含有两种经过优化的混合液,ProtoScript 酶混合液与 ProtoScript 反应混合液。ProtoScript 酶混合液含 M-MuLV 反转录酶和小鼠 RNase 抑制剂;ProtoScript 反应混合液含 dNTP 与经过优化的缓冲液。该试剂盒还包括两种优化的反转录引物和无核酸酶污染的水。锚定的 Oligo-dT 引物 [d(T)23VN] 迫使引物与 polyA 尾的起始端退火。经过优化的随机引物混合液能随机并持续性的与整个 RNA 模板配对,包括 mRNA 与无 polyA 尾的 RNA。合成的第一链 cDNA 产物长度可超过 13.0 kb。该试剂盒曾用名为 M-MuLV cDNA 第一链合成试剂盒。

ProtoScript cDNA 第一链合成试剂盒组份

– 10X ProtoScript 酶混合液
– 2X ProtoScript 反应混合液
– 随机引物混合液(60 μM)、Oligo d(T)23VN 引物(50 μM)**、无核酸酶污染的水

**Oligo d(T)23VN 和随机引物混合液含有 1 mM dNTP

ProtoScript cDNA 第一链合成试剂盒--NEB

使用 ProtoScript 试剂盒合成第一链 cDNA 。反应温度为 42℃,模板为 2 μg 人脾总 RNA。阴性对照反应(-RT)使用 1X ProtoScript 反应混合液进行。以部分第一链 cDNA 产物为模板,使用 1X LongAmp® Taq 2X 预混液(NEB #M0287)扩增三种不同信使 RNA 的特异序列。泳道 1:β 肌动蛋白基因的 1.1 kb 片段;泳道 2:β 肌动蛋白基因 1.1 kb 片段的–RT对照;泳道 3:Xrn-1 基因的 4.7 kb 片段;泳道 4:Xrn-1 基因 4.7 kb 片段的–RT对照;泳道 5:鸟嘌呤核苷酸交换因子 p532 的 9.8 kb 片段;泳道 6:鸟嘌呤核苷酸交换因子 p532 9.8 kb 片段的 -RT 对照。Marker M 为 2-Log DNA Ladder(NEB #N3200)。