核酸内切酶 V–NEB

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 修复蛋白

核酸内切酶 V                              收藏

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#M0305S
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特性

 切割含脱氧次黄嘌呤核苷的寡核苷酸
 切割错配 

概述

核酸内切酶 V 是在 E. coli 中发现的一种 DNA 修复酶。它识别 DNA 中的脱氧次黄嘌呤核苷,即脱氧腺苷的去氨基产物。核酸内切酶 V,也称为脱氧次黄嘌呤核苷 3´ 内切酶,识别含脱氧次黄嘌呤核苷(无论配对与否)的双链或单链 DNA。也可识别含脱碱基(AP)位点或尿素、碱基错配、插入/缺失错配、发夹结构、未配对 loop 环、折叠 flaps 和类 -Y 型结构的 DNA,但是识别后者的能力不如前者。普遍认为核酸内切酶 V 发挥 DNA 修复功能时,还需另外一种蛋白的存在,因为它不能切除 DNA 上的脱氧次黄苷或受损碱基。
 
核酸内切酶 V 对错配脱氧次黄嘌呤核苷 3´ 端第二个磷酸二酯键进行切割,产生一个 3´ 羟基、5´ 磷酸的切刻。 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有 Endo V 基因与编码麦芽糖结合蛋白(MBP)基因的融合基因。融合蛋白纯化后具有生物活性。该蛋白含 223 个氨基酸,分子量为 24.9 kDa。 

反应条件

1X NEBuffer 4
[50 mM KAc,20 mM Tris-Ac,10 mM Mg(Ac)2 ,1 mM DTT(pH 7.9 @ 25℃)],37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。 

质保声明

核酸内切酶 V 经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位指在 10 μl反应体系中,37℃ 条件下,1 小时内能够切割 1 pmol 含单脱氧次黄嘌呤核苷位点* 的 34 mer 寡核苷酸双链所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

* 脱氧次黄嘌呤核苷位点的制备:合成 34 mer 寡核苷酸双链时,在其一条链的中间掺入脱氧次黄嘌呤核苷(dI)碱基。 

浓度

10,000 units/ml。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。